今天我們講實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的另一種離心方法：差速離心法。差速離心法是交替使用低速和高速離心，用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同質(zhì)量的物質(zhì)分級(jí)分離的方法。此法適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分的分離。

1．工作原理

通常兩個(gè)組分的沉降系數(shù)差在10倍以上時(shí)可以用此法分離。例如某樣品中有大、中、小三個(gè)組分，用差速離心法分離時(shí)，把樣品放在離心管內(nèi)，先按大組分的沉降系數(shù)選擇離心轉(zhuǎn)速和離心時(shí)間，當(dāng)離心結(jié)束時(shí)正好使大組分全部沉降到離心管底部，這時(shí)中小組分中的一部分也會(huì)沉降到底部。若原始樣品液中三個(gè)組分的含量相等，則在原始樣品液中大組分占總組分量的三分之一。通過(guò)一次離心后分離出的大組分沉淀占總組分量約90%。如要進(jìn)一步提純可以把此沉淀物再溶解，再按大組分的沉降條件離心，得到大組分的第二次離心沉淀。通過(guò)多次對(duì)沉淀和上清液差速離心，可以把三個(gè)沉降系數(shù)有差別的組份分離提純，所以這個(gè)方法又稱為分步離心法。

2．差速離心法的優(yōu)缺點(diǎn)

差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是樣品的處理量較大，可用于大量樣品的初分離。其缺點(diǎn)是分離復(fù)雜樣品和要求分離純度較高時(shí)，離心次數(shù)多，操作繁雜。由于沉淀的多次清洗、溶解、再沉淀，容易引起中間損失，所以離心分辨力差。實(shí)際分離時(shí)由于離心時(shí)的對(duì)流、擴(kuò)散和收取沉淀時(shí)的污染，對(duì)于一些沉降系數(shù)相差不大的組分無(wú)法進(jìn)行*的分離提純。產(chǎn)品的純度和回收率都達(dá)不到上述理論值。因此差速離心法主要用于大量樣品的初步分離提純。

使用離心機(jī)進(jìn)行密度梯度離心和差速離心的差別主要有三點(diǎn)：

1．差速離心法是用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同質(zhì)量的物質(zhì)分級(jí)分離，密度梯度離心中單一樣品組份的分離是借助于混合樣品穿過(guò)密度梯度層的沉降或上浮來(lái)達(dá)到的。

2．差速離心用兩個(gè)甚更多的轉(zhuǎn)速，而密度梯度離心只用一個(gè)離心轉(zhuǎn)速。

3．差速離心是適用于混合樣品中各沉降系數(shù)差別較大組分，而密度梯度離心的物質(zhì)是密度有一定差異的。

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